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技術(shù)文章
2019-313
凝膠成像分析系統(tǒng)的選擇關(guān)鍵詞:凝膠成像分析系統(tǒng),化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng),多色熒光成像分析系統(tǒng),多功能活體成像分析系統(tǒng)一、前言:隨著生物學(xué)研究的逐漸加深和生物學(xué)相關(guān)的分子生物交叉學(xué)科研究逐步加深,分子成像分析系統(tǒng)的實(shí)際應(yīng)用逐漸的普遍化,但是現(xiàn)在廣大的用戶面對市場上品牌眾多進(jìn)口和國產(chǎn)的分子影像成像分析系統(tǒng)怎么樣選擇是一個(gè)難題。二、分子影像成像分析系統(tǒng)包括成像系統(tǒng)和分析軟件系統(tǒng),成像系統(tǒng)包括:,相機(jī),暗室,透射儀,UV和白光照明、琥珀色濾光玻片和UV防護(hù)罩等小配件,相機(jī)根據(jù)CCD有可...
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2019-31
(一)原理凡鹽析所獲得的粗制蛋白質(zhì)(鹽析得到的IgG)中均含有硫酸銨等鹽類,這類將影響以后的純化,所以純化前均應(yīng)除去,此過程稱為“脫鹽”(desalthing)。脫鹽常用透析法和凝膠過濾法,這兩種方法各有利弊。前者的優(yōu)點(diǎn)是透析后析品終體積較小,但所需時(shí)間較長,且鹽不易除盡;凝膠過濾法則能將鹽除盡,所需時(shí)間也短,但其凝膠過濾后樣品體積較大。所以,要根據(jù)具體情況選擇使用。前實(shí)驗(yàn)中樣品體積較小,凝膠達(dá)濾后樣品體積不會太增加,所以選用凝膠過濾法。(二)試劑與器材(1)Sephadex...
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2019-31
[原理]蛋白質(zhì)在十二烷基硫酸鈉(SDS)和巰基乙醇的作用下,分子中的二硫鍵還原,氫鍵等打開,形成按1.4gSDS/1g蛋白質(zhì)比例的SDS-蛋白質(zhì)多肽復(fù)合物,該復(fù)合物帶負(fù)電,故可在聚丙烯酰胺凝膠電泳中向正極遷移,且主要由于凝膠的分子篩作用,遷移速率與蛋白質(zhì)的分子量大小有關(guān),因此可以濃縮和分離蛋白質(zhì)多肽。聚丙烯酰凝膠電泳分離蛋白質(zhì)多數(shù)采用一種不連續(xù)的緩沖系統(tǒng),主要分為較低濃度的成層膠和較高濃度的分離膠,配制凝膠的緩沖液,其pH值和離子強(qiáng)度也相應(yīng)不同,故電泳時(shí),樣品中的SDS-多肽...
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2019-227
(一)原理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續(xù)系統(tǒng)”和“不連續(xù)系統(tǒng)”兩種電泳系統(tǒng)。“不連續(xù)系統(tǒng)”大的特點(diǎn)在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點(diǎn)是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統(tǒng);(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不相同。在實(shí)驗(yàn)中,電泳凝膠分為兩層:上層膠為低濃度的大孔膠,稱為濃縮膠或成層膠,配制此層膠的緩沖液是Tris-HCl,pH6.7;下層膠則是高濃度的小孔膠,稱為分離膠或電泳膠,成膠的緩...
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2019-227
【原理】瓊脂糖(agarose)是經(jīng)過挑選,以質(zhì)地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學(xué)上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復(fù)合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質(zhì),這種性質(zhì)會給電泳及凝膠過濾以的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列組成。瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時(shí)因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因?yàn)楣腆w支持物的影響少,故電泳速度快,區(qū)帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團(tuán),電滲影響很少,是...
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